Yağışma reaksiyasının qurulması üsulları

Mündəricat:

Yağışma reaksiyasının qurulması üsulları
Yağışma reaksiyasının qurulması üsulları
Anonim

Bu məqalə yağıntı reaksiyası fenomeninə həsr olunacaq. Burada biz bu fenomenin formalaşdırılmasının xüsusiyyətlərini, diffuziya fenomenini, ümumi xüsusiyyətləri, insan həyatındakı rolunu və daha çoxunu nəzərdən keçirəcəyik.

Fenomenə giriş

çökmə reaksiyasının ümumi xarakteristikası
çökmə reaksiyasının ümumi xarakteristikası

Presipitasiya seroloji tipli bir hadisədir, bu zaman həll olunan antigenlər antikorlarla qarşılıqlı əlaqədə olur və nəticədə çökmə müşahidə olunur - çöküntü.

Çöküntü reaksiyasının ümumi xarakteristikası bir formadadır. antigen və antikorun əlaqələndirilmiş təsiri. Bu tip qarşılıqlı təsirlər məlum anticisimləri və antigenləri əlavə etməklə test maddəsində naməlum antigenlərin olmasını müəyyən etməyə imkan verir. Duzların iştirakı olmadan çökmə prosesi daha da pisləşəcək və ən yaxşı optimal 7,0-7,4 pH diapazonundadır.

Reaksiyanın tərkib hissələri

yağış reaksiyasının komponentləri
yağış reaksiyasının komponentləri

Çöküntü reaksiyasının komponentləri arasında üç əsas element var:

  1. Molekulyar təbiətə malik antigen. İncə tipli vəziyyətdədir, başqa sözlə, ohəll olunur. Həmçinin, belə bir antigen presipitogen adlanır, o, lizat və ya toxuma ekstraktı və s. Presipitogen, tərkibindəki hissəciklərin ölçüsündə olan aqqlütinogendən xarakterik fərqə malikdir. Aqqlütinogen hüceyrənin özünəməxsus ölçüsünə malikdir və presipitojenlər molekulun ölçüsünə uyğundur. Antigen məhlulu şəffaflıqla xarakterizə olunur.
  2. İnsan qan serumunda, eləcə də tədqiq edilmiş antikorları ehtiva edən immun diaqnostik serumda aşkar edilmiş antikor.
  3. Elektrolitlər izotonik olan natrium xlorid məhlullarıdır.

Presipitogen istehsalı

Çöküntü reaksiyasının qurulması materialların üyüdülməsi və onlardan protein antigenlərinin çıxarılması ilə əldə edilən presipitojen olmadan mümkün deyil. Ekstraksiya qaynama və ya başqa üsullarla həyata keçirilir.

Lizatlar, həmçinin toxuma və orqan ekstraktları, qan zərdabları, mikrob bulyonu kulturalarına əsaslanan müxtəlif növ filtratlar, həmçinin mikroorqanizmlərin duz ekstraktı və avtolizat maddələri diqqəti cəlb edir. presipitojenlərə misal.

Yağış zamanı qurulur

İndi isə çökmə reaksiyasının qurulması üsulunu nəzərdən keçirək.

Xüsusi hazırlanmış sınaq borularında halqa-çökmə reaksiyası aparılır. Qabların boşluğuna zərdab daxil edilir, bir pipet ağzının köməyi ilə divarın üzərinə tökülür. Sonra, müvafiq miqdarda çöküntünün üstünə diqqətlə qatlanır və sonra boru üfüqi vəziyyətdən şaquli vəziyyətə gətirilir. Yağış reaksiyasının qurulması və nəzərə alınması çox vasvası bir əməliyyatdır. Nəticə antigen və antikor arasındakı sərhəddə ağ üzük göründükdən sonra qeyd olunur. Əgər reaksiyanın reaksiya verən elementləri bir-birinə uyğundursa, onda onlar birləşirlər, lakin bu, onların qarşılıqlı təsirindən uzun müddət sonra nəzərə çarpır

Çökmə reaksiyası həmçinin Petri qabında və ya şüşə üzərində aparılır. agar gelin köçürüldüyü yerdə sürüşdürün, kiçik bir təbəqədə tətbiq edin. Geldə sərtləşdikdən sonra antigenlərin və antikorların yerləşdiriləcəyi az sayda quyu kəsilir. Bu hərəkəti yerinə yetirməyin iki yolu var: radial immunodiffuziya və ikiqat immunodiffuziya.

çökmə reaksiyasından istifadə edilmir
çökmə reaksiyasından istifadə edilmir

Ümumi məlumat

Yağışmanın işinin mexanikası aglütinasiya qurğusuna bənzəyir. İmmun tipli zərdabın təsiri altında artıq reaksiyaya daxil olmuş antigen onun disperslik dərəcəsini azaldır. Əhəmiyyətli şərt həm serumun, həm də antigenin şəffaflığıdır.

Antigenləri antikorların üzərinə qoyarsanız, reaksiyanın qeydiyyatını yaxşılaşdıra bilərsiniz. Nəticədə, çöküntülərin halqa şəklində görünməsi müşahidə edilə bilər. Bu fenomen halqa yağışı adlanır və diametri 2,5 ilə 3,5 mm arasında olan xüsusi borularda həyata keçirilir. Çökmə reaksiyasının ən geniş yayılmış nümunələrindən biri qarayara diaqnozudur.

Çöküntü, agarda difteriya kulturasının toksigenlik səviyyəsini təyin etməyə imkan verir.

Baxılan reaksiya zamanıantigenik komplekslərin və antikorların çökməsi baş verir. Yağıntı xəstə və ya peyvənd olunmuş şəxsin və heyvanların qan zərdabında anticisimlərin miqdarını təyin etməyə imkan verən immunoloji hadisədir.

Titrasiya Nəticəsi

çökmə reaksiyasının qurulması üsulları
çökmə reaksiyasının qurulması üsulları

Yuxarıda göstərilən metodun titrlənməsi ilə əldə edilən məlumatların kəmiyyətlə ölçülə bilməyəcəyini bilmək vacibdir. Tərkibindəki antikorların sayının kəmiyyət qiymətləndirilməsini yaratmaq və təhlil etmək üçün M. Heidelberger və E. Kabat tərəfindən ekvivalent zonanın axtarışına və identifikasiyasına əsaslanan xüsusi reaksiya texnikası hazırlanmışdır. Antigenlərin yaş sayını sabit həcmli antiserum ilə qarışdırmaq ilkin əmələ gələn çöküntünün artmasına gətirib çıxarır, sonra isə antigen komplekslərini həll etmək qabiliyyətinin artması səbəbindən yenidən azalır. Hər bir boruda olan supernatantlarda antikorların miqdarını təyin edərək, antikorları olan müəyyən sayda qablarda maye itkin olacağını tapa bilərsiniz. Burada digər sınaq boruları ilə müqayisədə ən böyük çöküntü əmələ gələcək. Bu və antigen zülal çöküntüsünün zülalların ümumi dəyərindən çıxarılması hesabına tədqiq olunan spesifik zərdabın həcmində olan anticisimlərin dəqiq qiymətini almaq mümkündür. Bundan əlavə, çöküntünün zülal molekullarının miqdarı azotun miqdarı ilə və ya kolorimetrik üsullarla müəyyən edilir.

Dəyərlərin qiymətləndirilməsi

çökmə reaksiyasının qurulması və uçotu
çökmə reaksiyasının qurulması və uçotu

Diaqnostika metodologiyasında çökmə dəyərlərinin qiymətləndirilməsi immun zərdabda presipitin xassəsinə malik olmayan antikorun olması ehtimalını nəzərə almalıdır, bundan belə nəticə çıxarır ki, çöküntünün özü olmaya bilər. antigenlərlə reaksiya verdikdən sonra əmələ gəlir. Belə molekulların siyahısına natamam antikorlar və qamma-A qlobulinləri qrupundan bəzi növlər daxildir.

Laboratoriya şəraitində yağıntı reaksiyası müxtəlif modifikasiyalarda tətbiqini tapır. Məsələn, botulizm, qarayara və s.-nin termik denaturasiyaya uğramayan bakterial antigenlərini aşkar etmək üçün termoçökmə reaksiyasından istifadə olunur. Halqalı çökmədən fərqli olaraq, bu növ reaksiyada sözügedən materialın qaynadılmış halda filtratlarından istifadə edilir.

Mürəkkəb qarışıqda çökmə reaksiyasının təhlili qarışığın ayrı-ayrı elementlərinin xassələrini xarakterizə etməyə imkan vermir. Belə hallarda insan agarda çökdürmə üsuluna müraciət edir, həmçinin immunoelektroferezdən istifadə edir.

Diffuzlu yağıntı

yağış reaksiyaları
yağış reaksiyaları

Bu tədqiqat sahəsində diffuz yağış reaksiyası (RPD) anlayışı mövcuddur. Antikorların və həll olunan antigenlərin gelində diffuziya qabiliyyətinə əsaslanır. Diffuziya müəyyən bir maddənin molekulunun digərinin molekullarına nüfuz etmə qabiliyyətidir ki, bu da istilik hərəkəti nəticəsində yaranır.

Gel maye fazanın bərk fazada bərabər paylandığı dispers tipli sistemdir. Çox vaxt belə reaksiya üçün agar gelindən istifadə olunur.

Parametrləri verdikdən sonra,molekulların bir-birinə nisbətən yayıla biləcəyi şərtlər, onların görüşü antigen + antikor kompleksinin formalaşması ilə müşayiət olunacaq. Belə bir neoplazma, gelin özündə olmaqla yayıla bilir və çılpaq gözlə aşkarlana bilən bir zolaq şəklini alaraq çökəcək. Əgər antigen və antikor homoloji olarsa, heç bir zolaq əmələ gəlməyəcək.

Agar qatında olarkən diffuziyanın baş verəcəyi şəraitin yaradılması komponentlərin tökülməsini nəzərdə tutur, lakin quyuların ümumi sayı və onların nisbi mövqeyi müəyyən edilir. tələb olunan tapşırığın növünə qərar verin. RPD şəxsə məlum antikor seralarından istifadə edərək test edərək naməlum təcrid olunmuş virusları aşkar etmək və müəyyən etmək imkanı verir.

Tətbiq

diffuz yağış reaksiyası
diffuz yağış reaksiyası

Presipitasiya təkcə xəstəliklərin diaqnostikasında deyil, həm də məhkəmə tibbi ekspertizasında öz tətbiqini tapır. Yağış reaksiyasından istifadə etməyən cinayət silahında tapılan qan növlərini, orqan və ya toxumanın bir hissəsini müəyyən etmək mümkün olan bir analizi təsəvvür etmək çətindir. Bu proses zamanı müxtəlif heyvan və quşların immunizasiyası yolu ilə əldə edilən çöküntü zərdablarından istifadə edilir. Serum titrinin səviyyəsinin 1:10000-dən az olmaması vacibdir və o, həm də kifayət qədər spesifikliyə malik olmalıdır. Qan və ya onun qabığının aşkar edilmiş yerindən fiziki üçün ekstrakt hazırlanır. daha da məruz qalacaq həllçökdürən serum. Bu reaksiyaya əsasən, həm insanların, həm də heyvanların toxuma və orqan zülallarının növlərini təyin etmək mümkündür. Buludlu ekstraktların əldə edilməsi insanı agarda yağıntıya müraciət etməyə məcbur edir.

Nəticələr

Oxunan məlumatı təhlil edərək belə nəticəyə gələ bilərik ki, çökmə reaksiyaları insan üçün son dərəcə vacibdir, çünki onlar antikorlardan istifadə edərək müxtəlif antigenlərin diaqnostikasını aparmağa imkan verir, bu fenomen məhkəmə-tibbi ekspertizasında da geniş istifadə olunur və onun növünü müəyyən etməyə imkan verir. müəyyən bir mövzuya münasibətdə qan, toxuma və ya orqan. Həll olunan problemin ortaya çıxan ehtiyaclarına uyğun olaraq istifadə edilən yağıntının bir neçə növü və üsulu var.

Tövsiyə: