Müasir tibb patogenin, immun reaksiyanı stimullaşdıran genetik cəhətdən yad maddələrin, nuklein turşularının, həmçinin allergik və immun dəyişikliklərin tərifinə əsaslanaraq insanlarda xəstəliklərin etiologiyasını təyin etməyə imkan verən spesifik diaqnostik üsullara malikdir. onun hərəkətləri nəticəsində baş verir. Bu gün RİA immunologiya və virusologiyada geniş istifadə olunur, yəni radioimmunoassay, təyin edilməsinin məqsədləri, komponentləri, kursu, uçotu bu məqalədə nəzərdən keçirəcəyik. Bu analiz antigenləri onların antikorlarla qarşılıqlı əlaqəsi nəticəsində aşkar edə bilir.
Tərif
RIA mayelərdə bioloji aktiv maddələrin diaqnostikası üçün metoddur, xüsusi bağlama sistemləri olan radionuklidlərlə işarələnmiş analoq maddələrdən istifadə zamanı antigenlərin antikorlarla reaksiyasına əsaslanır. Onların qarşılıqlı əlaqəsindən sonraimmun kompleks əmələ gəlir, o, ayrılır və onun radioaktivliyi öyrənilir. Məlumdur ki, radioimmunoassay standart reagent dəstlərindən istifadə etməklə həyata keçirilir.
Hər bir reagent bir xüsusi maddənin konsentrasiyasını təyin edə bilir. İnsandan alınan bioloji maye reagentlə qarışdırılır, inkubasiya dövründən sonra sərbəst və birləşmiş radioaktiv maddələr ayrılır, sonra radiometriya aparılır və nəticələr hesablanır. Maddələri etiketləmək üçün yodun izotopundan istifadə olunur. O, müəyyən miqdarda qeyd olunur və əlavə edilir.
Tətbiq
Radioimmun analizi tibb və mikrobiologiyada geniş tətbiqə malikdir. Ürək və damar xəstəliklərinin, endokrin və digər bədən sistemlərinin xəstəliklərinin diaqnostikasında istifadə olunur. Sonsuzluğun səbəbini, dölün inkişafının patologiyasını müəyyən etmək üçün də RİA tez-tez istifadə olunur. Onkologiyada bu analiz müalicənin effektivliyini izləyə bilmək üçün neoplazmaların markerlərini müəyyən etmək üçün aparılır. İmmunologiyada RİA qanda immunoqlobulinlərin, fermentlərin, zülalların və s. Bu gün bu analiz bir qramın milyonda birinə qədər müxtəlif hormonların konsentrasiyasını aşkar etməyə imkan verir. Beləliklə, radioimmun qanın analizindən kardiologiya, onkologiya, endokrinologiya, ginekologiya və virusologiyada geniş istifadə olunur.
RIA Metodları
Xarakterindən asılı olaraq bir neçə analiz metodunu ayırmaq adətdir.reaksiyalar:
- Qeyri-rəqabətli metod standart və aşkar edilə bilən antigenlər, bufer məhlulu, izotopla işarələnmiş anticisimlər, sorbentlə birləşən müəyyən anticisimlər kimi reaksiya komponentləri ilə xarakterizə olunur. Test ediləcək antikorlara bir antigen əlavə edilir. İnkubasiyadan sonra antigen-antikor kompleksləri yaranır, sorbent yuyulur, kompleksdə antigenlə birləşən etiketli antikorlar əlavə edilir. Radioaktivlik yoxlanılan antigenin konsentrasiyasından asılıdır.
- Rəqabətli radioimmunoassay antigen rəqabəti ilə idarə olunur. Burada nəzarət və təyin edilmiş antigenlər, bufer məhlulu, sorbentlə birləşən müəyyən antikorlar, həmçinin izotopla işarələnmiş antigen kimi reaksiyanın belə komponentləri var. Diaqnoz tədqiq olunan antigenin tətbiqi ilə başlayır. Sorbent üzərində antigen-antikor kompleksi əmələ gəlir. Sonra sorbent yuyulur və etiketli antigen yeridilir. Bunu edərkən, antikora bağlanır. Sayğacların köməyi ilə reaksiya və radioaktivliyin miqdarı ölçülür. Bu, nümunədəki antigenin miqdarına tərs mütənasib olacaq.
- Dolayı üsul ən çox yayılmışdır. Bu halda, reaksiya komponentinin radioimmunoanalizi nəzarət və sınaq serumu, sorbent üzərində bağlanmış antigenlər və ya antikorlar, izotoplarla işarələnmiş antikorlar, tampon məhlulları kimi olur. Diaqnoz qoyulmuş antikorlar və ya antigenlər sorbentə bağlı olan antigenlər və ya antikorlarla reaksiya verir. Sonra inkubasiya çıxarılır, etiketli antikorlar vurulur, onlar bağlanırantigen-antikor kompleksləri.
Təhlil Metodologiyası
Beləliklə, radioimmunoassay xüsusi reagentlərdən istifadə etməklə aparılır. Dəstlər standartdır, ona görə də hər hansı bir səhv və ya pozuntuya yol verilmir. Diaqnostik nəticələr etibarlıdır. Təhlil səhər aparılır, bunun üçün bir insandan venoz qan alırlar. Laboratoriyada qandan zərdab ayrılır, ondan RİA üçün istifadə olunacaq. Bu serum reagentlərlə qarışdırılır. Nəticədə qarışıq müəyyən bir temperaturda termostatda inkubasiya edilir.
Sərbəst və bağlı izotoplar yaranan qarışıqda ayrılır. Bundan sonra daxil olan material yoxlanılır, nəticələr hesablanır. Radioimmunoassay mexanizminin bir neçə variantı var. Yuxarıda təsvir edilən texnika maye fazalı RİA-dır, çünki bütün komponentlər maye vəziyyətdədir. Antikorların mayedə həll olunmayan bir daşıyıcıya yerləşdirildiyi RİA və bərk faza var.
Diaqnostikanın mövcudluğu
Bu diaqnostik metodun tibbdə istifadəsi hər il daha çox populyarlaşır. Son zamanlarda radioimmunoassay standart diaqnostik metoda çevrilmişdir ki, bu da son diaqnoz qoyularkən həkim tərəfindən təyin oluna bilər. Uzun müddətdir ki, bu tip analizlər yalnız laboratoriyalarda aparılırdı, bu gün ümumi tədqiqat metoduna çevrilmişdir. Lakin RİA bahalı avadanlıqların (qamma sayğacları) istifadəsini tələb edir və reagent dəstlərinin xidmət müddəti qısadır. Bütün bunlar onu müəyyən edən belə bir təhlilin əsas çatışmazlığıdırbahalı qiymət.
Bundan əlavə, RİA son vaxtlar izotoplarla qarşılıqlı əlaqə tələb etməyən daha müasir tədqiqat metodlarını sıxışdırmağa başlayıb. Bunlara ferment immunoassay daxildir. Beləliklə, RİA bir çox klinikada arzu edilir. O, uzun müddətdir ki, böyük şəhərlərdə və diaqnostika mərkəzlərində istifadə olunur, lakin kiçik şəhərlərdəki adi xəstəxanalarda bu analiz yüksək qiymətə görə praktiki olaraq istifadə edilmir.
RIA-nın ləyaqəti
Radioimmunoassay bir çox üstünlüklərə malikdir. Bu olduqca spesifikdir və yüksək həssaslığa malikdir, bu da bioloji aktiv maddələrin inanılmaz dərəcədə az miqdarda mövcudluğunu müəyyən etməyə imkan verir. Bu analiz çox sadə bir şəkildə aparılır, bir insandan yalnız venoz qan bağışlaması tələb olunur. Test nəticələri 100% dəqiqdir və ertəsi gün hazırdır. RİA da asanlıqla avtomatlaşdırıla bilər. Beləliklə, bu analiz yoluxucu bakteriyaların tullantı məhsulları olan zülalları müəyyən etməyə imkan verir ki, bu da orqanizmdə infeksiyanın olduğunu göstərir.
Virusologiyada Diaqnoz
Ən perspektivli RİA virusologiya üçündür, çünki o, virus patogenlərini tez müəyyən etməyə imkan verir. Buna səbəb son illər yüksək sürətlə yayılan, insanlar arasında ölüm hallarına səbəb olan müxtəlif infeksiyalara yoluxma hallarının artmasıdır. Bu, xüsusilə yüksək olmayan ölkələr üçün doğrudursosial və iqtisadi inkişaf (Uzaq Şərq ölkələri), radioimmunoassay burada sadəcə əvəzolunmazdır. Mikrobiologiya patogen bakteriyaların törətdiyi yoluxucu xəstəliklərin aşkarlanması üçün də bu diaqnostik metoddan istifadə edir. Məsələn, RİA tifo qızdırmasını aşkar etmək üçün geniş istifadə olunur. Xəstəliyin ilk günlərində, müalicə təyin etməzdən əvvəl, nəcis və qusmanın öyrənilməsi lazımdır. Lakin diaqnostik nəticələr uzun müddətdən sonra əldə olunacaq. Burada RİA köməyə gəlir, analiz qısa müddətdə xəstəliyin törədicini müəyyən etməyə imkan verir. Bir şəxs qan verir, ertəsi gün tədqiqatın nəticələri hazırdır. Bu analiz dəqiq diaqnoz qoymağa kömək edir.
Nəticələr
Radioimmunoassay hazırda ən həssas diaqnostik üsullardan biridir. Antikorların əldə edilə biləcəyi hər hansı bir maddəni təhlil etmək üçün istifadə olunur. Bu üsul tədqiq edilən mayenin ən kiçik həcmində çoxlu nümunələr hazırlamağa, həmçinin tam avtomatlaşdırıla bildiyi üçün nəticələri ən qısa müddətdə qeyd etməyə imkan verir. Bu analiz 1950-ci illərdə Solomon Burson tərəfindən hazırlanmışdır. Otuz ildən sonra geniş yayıldı. Bu günə qədər RİA-ya yüz faiz alternativ yoxdur, çünki təhlil yüksək həssaslığa malikdir. RİA tibbin müxtəlif sahələrində, həmçinin mikrobiologiya və virusologiyada istifadə olunur.
Nəhayət
Virusologiyada metodun istifadəsi bu gün çox aktualdırinfeksiyaların yayılmasını araşdırmaq, dəqiq diaqnoz qoymaq və xüsusi müalicəni təyin etmək bacarığı. Bu problem iqtisadiyyatı və sosial inkişafı aşağı səviyyədə olan ölkələr üçün xüsusilə aktualdır. Həmçinin, bu analiz insan orqanizmində hormonların və fermentlərin miqdarını aşkar etməyə imkan verir. Etibarlı nəticələr əldə etmək üçün tədqiqatçı yalnız analiz üçün qan verməlidir. Tibb hələ də dayanmır, radioimmunoassay ilə yanaşı, yeni tədqiqat üsulları ortaya çıxır, lakin RİA tibbi diaqnostikada liderlərdən biri olmağa davam edir.
