Bakteriyalar üzərində araşdırma çoxsaylı avadanlıq və alətlərlə ciddi iş tələb edir. Mikroorqanizmlərin laboratoriya şəraitində mümkün qədər tez çoxalması və normal həyat fəaliyyətini davam etdirə bilməsi üçün xüsusi qida mühitindən istifadə olunur. Onların tərkibi və biofiziki şəraiti bakterial mədəniyyətin aktiv böyüməsi üçün uyğundur.
Qida mühiti. Mikrobiologiya və digər proqramlar
Bakteriya koloniyaları laboratoriyada jele kimi və ya yarı maye tərkibləri ilə doldurulmuş Petri qablarında yetişdirilir. Bunlar yüksək keyfiyyətli məhsul yetişdirmək üçün tərkibi və xassələri təbii olanlara mümkün qədər yaxın olan qida mühitləridir.
Belə mühitlər mikrobioloji tədqiqatlarda və tibbi diaqnostika laboratoriyalarında istifadə olunur. Sonuncular ən çox patogen və ya fürsətçi bakteriyaların ləkələri ilə işləyir, onların sistematik mövqeyi birbaşa müəssisədə müəyyən edilir.
Təbii və sintetikçərşənbə
Bakteriyalarla işləməyin əsas qaydası qida mühitinin düzgün seçilməsidir. O, mikro və makro elementlərin, fermentlərin tərkibi, sabit turşuluq dəyəri, osmotik təzyiq və hətta havadakı oksigenin faizi daxil olmaqla çoxsaylı meyarlara cavab verməlidir.
Qidalandırıcı media iki böyük qrupa bölünür:
- Təbii mühitlər. Belə qarışıqlar təbii maddələrdən hazırlanır. Bu çay suyu, bitki hissələri, peyin, tərəvəz, bitki və heyvan toxumaları, maya və s. ola bilər. Belə mühitlər təbii kimyəvi maddələrin yüksək tərkibi ilə xarakterizə olunur, müxtəlifliyi bakterial mədəniyyətin inkişafına kömək edir. Bu aşkar üstünlüklərə baxmayaraq, təbii mühitlər xüsusi bakteriya ştammları ilə ixtisaslaşmış tədqiqatlara imkan vermir.
- Sintetik media. Onlar kimyəvi tərkibinin bütün tərkib hissələrinin dəqiq nisbətlərində məlum olması ilə fərqlənirlər. Bu cür media maddələr mübadiləsi tədqiqatçıya əvvəlcədən məlum olan bakteriyaların müəyyən bir mədəniyyəti üçün hazırlanır. Əslində, bu səbəbdən mikroorqanizmlərin inkişafı üçün belə bir sintetik mühit hazırlamaq mümkündür. Onlar bakteriyaların həyati fəaliyyətini təhlil etmək üçün istifadə olunur. Məsələn, onların ətraf mühitə hansı maddələri və nə qədər buraxıldığını öyrənə bilərsiniz. Mikroorqanizmlər təbii mühitlərdə də böyüyəcək, lakin maddələrin ilkin nisbətlərini bilmədiyi üçün tərkibində hər hansı kəmiyyət dəyişikliyini izləmək mümkün deyil.
Diferensial-diaqnostik mühitlər
Bakteriyalarla işləyərkən təkcə adi qida mühitindən istifadə etmək olmaz. Mikrobiologiya geniş bir elmdir və buna görə də bir araşdırma apararkən bəzən nədənsə mikroorqanizmlərin seçimini etmək lazımdır. Laboratoriyada differensial diaqnostik vasitələrdən istifadə Petri qabında arzu olunan bakteriya koloniyalarını onların həyat fəaliyyətinin biokimyəvi əlamətinə görə seçməyə imkan verir.
Belə mühitlərin tərkibinə həmişə aşağıdakı komponentlər daxildir:
1. Hüceyrə böyüməsi üçün qidalar.
2. Analiz edilmiş substrat (maddə).
3. Müəyyən reaksiya baş verdikdə xarakterik rəng verəcək göstərici.
Misal diferensial diaqnostik qida mühiti "Endo"dur. Laktozanı parçalaya bilən bakteriya koloniyalarını seçmək üçün istifadə olunur. Əvvəlcə bu mühit çəhrayı rəngə malikdir. Mikroorqanizmlərin koloniyası laktoza parçalaya bilmirsə, adi ağ rəng alır. Bakteriyalar bu substratı parçalaya bilsələr, xarakterik parlaq qırmızı rəngə çevrilirlər.
Seçmə çərşənbələri
Diaqnostika laboratoriyaları çox vaxt müxtəlif növ bakteriya olan tamponlarla işləyir. Aydındır ki, keyfiyyətli iş üçün onlarla kənardan bizə lazım olan koloniyaları birtəhər seçmək lazımdır. Burada yalnız bir növ mikroorqanizmi dəstəkləmək üçün ideal şəkildə hazırlanmış bir bakterial inkişaf mühiti kömək edə bilər.
Məsələn,belə bir seçmə mühit yalnız Escherichia coli-nin çoxalması üçün uyğundur. Sonra Petri qabına çoxlu bakteriya səpməklə, biz yalnız eyni Escherichia coli-nin koloniyalarını görəcəyik, daha çox deyil. İşə başlamazdan əvvəl, tədqiq olunan bakteriyanın digər növlərin qarışığından uğurla seçilməsi üçün onun metabolizmini yaxşı bilmək lazımdır.
Bərk, yarı bərk və maye kultura mühiti
Bakteriyalar təkcə bərk substratlarda yetişdirilə bilməz. Qida mühitləri bir-birindən yığılma vəziyyətinə görə fərqlənir, bu da istehsal zamanı tərkibindən asılıdır. Əvvəlcə onların hamısı maye konsistensiyaya malikdir və müəyyən faizlə jelatin və ya agar əlavə edildikdə, qarışıq bərkiyir.
Maye kultura mühitləri adətən sınaq borularında olur. Belə şəraitdə bakteriya yetişdirmək zərurəti yaranarsa, mədəniyyət nümunəsi ilə məhlul əlavə edin və 2-3 gün gözləyin. Nəticə dəyişə bilər: çöküntü əmələ gəlir, film görünür, kiçik lopalar üzür və ya buludlu məhlul əmələ gəlir.
Bakteriya koloniyalarının xassələrini öyrənmək üçün mikrobioloji tədqiqatlarda tez-tez sıx mədəniyyət mühitindən istifadə olunur. Belə mühitlər həmişə şəffaf və ya şəffaf olur ki, mikroorqanizmlərin kulturasının rəngini və formasını düzgün müəyyən etmək mümkün olsun.
Media hazırlığı
Bulyon, jelatin və ya agar əsasında ət-pepton qarışıqları kimi substratları hazırlamaq çox asandır. Əgər bərk və ya yarı maye substrat etmək lazımdırsa, maye halına salınmüvafiq olaraq 2-3% və ya 0, 2-0, 3% jelatin və ya agar əlavə edin. Qarışığın sərtləşməsində böyük rol oynayırlar, lakin onlar qida mənbəyi deyillər. Beləliklə, bakterial kulturanın böyüməsi üçün uyğun olan qida mühitləri əldə edilir.
